系统:APS-8026A
高效液相色谱仪由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。高效液相色谱仪(HPLC)是应用高效液相色谱原理,主要用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物的仪器设备。
高效液相色谱法只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。与试样预处理技术相配合,HPLC所达到的高分辨率和高灵敏度,使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能,能够分离复杂相体中的微量成分。随着固定相的发展,有可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离。
高效液相色谱仪器原理是什么?
高效液相色谱仪主要的组成部件为高压输液泵、进样装置、色谱柱、检测器和色谱数据处理装置。1.高压输液泵由于高效液相色谱所使用的色谱柱一般装填小于10μm的固定相颗粒,故对流动相有较大的阻力,所以对于泵的耐压有一定的要求。除此之外,对于输液泵还有泵体材料耐化学腐蚀、输出流量范围宽、输出流量稳定等要求。高压输液泵可以分为恒压泵和恒流泵两大类。恒压泵是指输出恒定压力的泵,当系统阻力不变时可以保持恒定流量,但系统阻力发生变化时,就会影响到系统流量稳定,因此现在基本已不使用。恒流泵是指可输出恒定体积流量的泵,又分为注射型泵和往复式柱塞泵两类。注射型泵由于其工作过程中需停流吸液以及价格昂贵等原因,目前基本不用于高效液相色谱仪中。往复式柱塞泵则可以提供低脉动的连续稳定液流,广泛应用于各种商品化仪器中,并衍生出了双柱塞往复式并联泵、双柱塞往复式串联泵、双柱塞独立驱动的往复式串联泵等多种设计。2.进样装置在HPLC分析中由于使用了高效颗粒填料和高压的流动相,因而对样品的进样方式要求提高,需要使样品在进入色谱柱头时准确地注人其上端填料的中心,形成集中的一点,以保证扩散效应影响降到最低。为实现以上要求有两种设计:停流进样和六通阀进样,但现在停流进样技术已经完全被简单易用的六通阀进样方式所取代。3.色谱柱色谱柱一般使用内壁抛光的直型不锈钢管作为柱管以获得高柱效。当使用粗内径短柱和细内径色潜柱时,需要注意柱外效应所引起的色谱峰展宽,应该尽量缩短进样器至检测器之间的连接管路,以获得更小的柱外死体积。HPLC色谱柱装填的固定相,其基体材料多为全多孔球形或无定形的硅胶颗粒,在高压下使用匀浆装柱法装填,并在色谱柱两端使用多孔不锈钢烧结材料的过滤片以阻挡流动相中的微小机械杂质进入,并防止固定相流失。4.检测器检测器主要用于检测经色谱柱分离后的组分浓度变化。常用的检测器为紫外/可见光检测器、荧光检测器、示差折光检测器、蒸发光散射检测器等。5.色谱数据处理装置高效液相色谱的分析结果数据现已广泛使用色谱数据工作站来记录和处理。色谱工作站基于微型计算机的硬件,可以实现如下功能:(1) 仪器操作参数的控制功能——色谱仪的所有可控参数,均可预先设定并保存记录,在运行样品时自动调用并传输至仪器。(2) 数据采集和处理功能——可通过计算机和仪器之间的数据传输接口自动采集色谱数据。并根据指定处理参数进行数据处理,提供色谱图的相关积分数据,还可以选择不同的标准计算方式来对样品自动进行计算,得到定性或定量的结果。还具有计算柱效、绘制工作曲线等其他功能。气相色谱和液相色谱仪分别是由哪几部分组成的
气相色谱法是采用惰性气体(或称载气)作为流动相的色谱方法。色谱过程是通过气相色谱仪来完成的。气相色谱仪一般有5个基本部分组成:
1?气路系统?包括载气、燃烧气、助燃气、气体净化器流速控制和测量器
2?进样系统?进样器、气化室;温度控制装置
3?分离系统?色谱柱和柱箱、柱温控制装置
4?检测系统?检测器、检测器的电源及控温装置
5?记录系统?放大器、记录仪以及数据处理装置
气相色谱法的特点和适用范围
(一)气相色谱法的特点
气相色谱法具有人们公认的优点、特点:
1分离效率高,分析速度快
2选择性能好
3样品用量少和检测灵敏度高
4操作简单,费用低少,应用广泛
(二)气相色谱法的适用范围
气相色谱分析操作简单,分析快速,选择性好,柱效能高,可以应用于分析气体试样,也可以分析易挥发或可转化为易挥发的液体和固体,不仅可分析有机物,也可分析部分无机物。一般,只要沸点在500oC以下,热稳定性良好,相对分子质量在400以下的物质,原则上都可采用气相色谱法。目前气相色谱法所能分析的有机物,约占全部有机物的15%~20%,而这些有机物都是目前应用很广的那一部分,因而气相色谱法的应用是十分广泛的。
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