多糖醇沉原理即多糖是多羟基的醛或酮,可溶于水,但是在多糖水溶液中加入乙醇会破坏多糖水溶液中的氢键,从而降低多糖在水中的溶解度,使多糖以沉淀的形式析出。不同浓度的醇沉淀的组分不一样,一般采取分级醇沉。醇沉的时候单糖也可以被醇沉出来,醇浓度越高单糖被沉淀出来的量也会越高,多糖乙酰化醇沉没有沉淀的原因为目标物的溶解度,多糖的量没有足够多以及目标物在纯化过程中被吸附、滤除、分解。
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多糖醇沉是什么原理
多糖是多羟基的醛或酮,可溶于水,但是在多糖水溶液中加入乙醇会破坏多糖水溶液中的氢键,从而降低多糖在水中的溶解度,使多糖以沉淀的形式析出。不同浓度的醇沉淀的组分不一样,一般采取分级醇沉。醇沉的时候单糖也可以被醇沉出来,醇浓度越高单糖被沉淀出来的量也会越高。
就是利用溶解度,和盐析原理类似。
多糖如果参用分级醇沉,会分出来不同分子量的多糖,但是这仅仅是一个粗分,醇沉很容易包裹一些小分子,导致样品不纯,需要进一步做色谱层析,一般多糖用G25,或者S400(可加压)。
醇沉多糖的问题——急!!!
盐浓度主要影响蛋白质的沉淀,对多糖的沉淀影响不大。
我觉得是你的醇浓度不够,所以没有形成多糖沉淀。用三倍95%的乙醇,这样形成的溶液纯度只有71%,有点低了。最好用无水乙醇去混合。而且要注意原始溶液浓度不能太低。
多糖提取中,加入乙醇后什么沉了
是为了除去沉淀物之中的水分。由于水提醇沉法沉淀物多为多糖、蛋白质等大分子复合物,具有较强的吸水性。沉淀物单凭烘干无法除去其中的水分,会使沉淀产物含有较多的水分,影响产物性状(是产物呈胶状,而非粉末状固体)以及纯度是产物无法进行精确的定量分析。醇沉后用无水乙醇洗涤,除去一部分水分;再用可溶于水的丙酮洗涤,确保水分除净;最后用无水乙醚洗涤沉淀物,除去残存的乙醇、丙酮和溶于其中的水分。这样就可以得到较纯的多糖或蛋白质了。
醇沉后为什么还加水去沉淀
醇沉后还加水去沉淀是为了去除极性小的杂质,常同冷藏静置联合应用。水提醇沉法系指在中药水提浓缩液中加乙醇使达适当的浓度,难溶于醇的杂质沉淀析出,经固液分离达到精制目的的方法。
水提醇沉法的原理和操作
水提醇沉的原理是利用某些成分在水和醇中的溶解度差异,加入醇后使其溶解度变小而沉淀,一般来说水提会将药物中的大极性物质都提出来比如多糖,蛋白质,水溶性生物碱,淀粉等,而这些成分在醇中的溶解度就没有水中大。
所以缓慢加入醇溶液,当醇的浓度到达一定程度之后,多糖,淀粉这些就会沉淀下来。
将中药水提液浓缩至每毫升相当于药材1到2g,浓缩液放冷后,慢加快搅,边搅拌边缓慢加入乙醇使达规定含醇量,密闭冷藏24到48小时,滤过,回收乙醇,沉淀乙醇洗涤,得到精制液。
VS醇提水沉法,避免淀粉,蛋白质,黏液浸出,沉淀树脂,油脂,色素等杂质。