1、先将磷酸盐溶解于500毫升蒸馏水中,用1摩尔每毫升的氢氧化钠溶液校正酸碱度后,再用蒸馏水稀释至1000毫升。
2、取储存液1点25毫升,用蒸馏水稀释至1000毫升。分装每瓶100毫升或每管10毫升,121摄氏度高压灭菌15分钟。
磷酸盐缓冲液配制是什么?
磷酸盐缓冲液配制是由磷酸二氢钠和磷酸氢二钠组成的溶液。用于样品的稀释。配置方法为1mol磷酸盐缓冲溶液配制方法为,先将磷酸盐溶解于500mL蒸馏水中,用1mol每L氢氧化钠溶液校正pH后,再用蒸馏水稀释至1000mL。
磷酸盐缓冲液的定义
磷酸盐缓冲液Phosphate Buffered Saline,简称PBS是常用的用于生物学研究的一个缓冲溶液。PBS可以为三种溶液的英文缩写。
分别是磷酸盐缓冲溶液phosphate buffered solution,磷酸盐缓冲盐水phosphate buffered saline及磷酸盐缓冲钠phosphate buffered sodium,其配制方法不同,pH值不同,发挥的生物学作用亦不完全相同。
主要用于一些化学实验中不影响实验反应的情况下调节pH值,以便让实验的化学反应在最佳条件下进行。部分用于食品或是饲料行业加工,如食品检验中Elisa方法的洗板应用或者食品微生物检验中的稀释缓冲液。
磷酸缓冲液配制方法
NaH2PO4•2H2O:10.86105g(或NaHPO4•12H2O:21.8502g) + NaH2PO4•2H2O:6.08595g(或NaH2PO4•H2O:10.76g),溶解,定容至1L
上述药品都是极易溶的,直接溶解就行了
附 磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液(0.2mol/L)
pH值;0.2mol/LNa2HPO4溶液(mL);0.2mol/LNaH2PO4溶液(mL)
5.8 ;8.0; 92.0
5.9 ;10.0 ; 90.0
6.0; 12.3 ; 87.7
6.1 ;15.0 ; 85.0
6.2 ;18.5 ; 81.5
6.3 ;22.5; 77.5
6.4 ;26.5 ;73.5
6.5 ;31.5 ; 68.5
6.6 ;37.5; 62.5
6.7 ;43.5 ; 56.5
6.8 ;49.0; 51.0
6.9; 55.0 ; 45.0
7.0 ;61.0 ; 39.0
7.1 ;67.0 ; 33.0
7.2 ;72.0 ; 28.0
7.3 ;77.0 ; 23.0
7.4 ;81.0; 19.0
7.5 ;84.0 ; 16.0
7.6 ;87.0; 13.0
7.7 ;89.5; 10.5
7.8 ;91.5; 8.5
7.9 ;93.5 ; 7.5
8.0; 94.7 ; 5.3
NaH2PO4•2H2O:Mr=178.05,0.2mol/L溶液为35.61g/L
NaHPO4•12H2O:Mr=358.22,0.2mol/L溶液为71.64g/L
NaH2PO4•2H2O:Mr=156.03,0.2mol/L溶液为31.21g/L
NaH2PO4•H2O:Mr=138.01,0.2mol/L溶液为27.6g/L。
此外,关于常用缓冲液的配方,你随便找一本生物化学实验书,翻至后面的附录就可以看到了
磷酸缓冲液的配制是什么?
配制方法:
0.2M磷酸缓冲液
磷酸缓冲液PH5.7--8.0(0.2M)。
甲液:
NaH2PO4·2H2O:Mr=156.03,0.2mol/L溶液为31.21g/L。
NaH2PO4·H2O:Mr=138.01,0.2mol/L溶液为27.6g/L。
乙液:
Na2HPO4·2H2O:Mr=178.05,0.2mol/L溶液为35.61g/L。
Na2HPO4·7H2O:Mr=268.13,0.2mol/L溶液为53.624 g/L 。
Na2HPO4·12H2O:Mr=358.22,0.2mol/L溶液为71.64g/L。
磷酸缓冲液PH5.7--8.0(0.2M)。
根据要求的PH值,取X毫升甲液与Y毫升乙液,混合均匀即得。
缓冲范围
磷酸缓冲液的缓冲pH值范围非常广泛,可配置各种pH值的酸性、碱性和中性缓冲液,配制酸性缓冲液可直接用NaH2PO4或KH2PO4,pH范围在1-5。
碱性缓冲液可直接用Na2HPO4或K2HPO4,pH范围在9-12;中性缓冲液则用等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合,pH在5.5-8.5。
浓度计算
通常所说的磷酸缓冲液的浓度是指溶液中含有的所有的磷酸根离子的浓度,而不是钠离子(Na+)或者钾离子(K+)的浓度。正是因为如此,在配制中性缓冲液时,用等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合。
并不影响磷酸根离子的浓度,所得的缓冲液浓度仍是等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液原来的浓度,但是缓冲液中的钠离子(Na+)或者钾离子(K+)的浓度已经发生变化。
以上内容参考 百度百科-磷酸缓冲液
PBS缓冲液的配制
配制方法:
称取磷酸二氢钾(KH2PO4),磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O),氯化钠(NaCl),氯化钾(KCl),吐温-20 ,加水。
PBS:Phosphate Buffered Saline
PBS 1L配方pH7.4:磷酸二氢钾(KH2PO4):0.27g,
磷酸氢二钠(Na2HPO4):1.42g,
氯化钠(NaCl):8g,
氯化钾(KCl)0.2g,
加去离子水约800mL充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调pH至7.4,最后定容到1L。
扩展资料PBS缓冲液的作用:
PBS是磷酸缓冲盐溶液的简称,不仅伪狂犬病毒要用它稀释,一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释。
原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用,蒸馏水不具有盐平衡作用,可以破坏生物蛋白的结构及生物特性;生理盐水不具有调整pH的作用,对完整的、具有活性的物质不能保证其在最适条件下参与生物反应,所以使用PBS是首选。
PBS也不是万能的,有的生物活性物质需要的条件比PBS还要高,就需要在平衡缓冲液中加入更多的成分,维持最佳的条件保证生物活性物质保持其最完整的特性。
参考资料:
百度百科-pbs缓冲液