弗氏完全佐剂是一种油包水的乳浊液,能够非常有效的诱导产生高滴度的抗体。
弗氏完全佐剂含结核分枝杆菌的细胞壁成分,可以加强对抗原的抗体反应。它来自于油滴中免疫原的持续释放,并刺激局部的免疫反应。弗氏完全佐剂是含有灭活的分枝丁酸梭菌的矿物油佐剂,对于鱼类而言,能够增强鱼类的免疫效应力。
弗氏完全佐剂的组成包括
弗氏完全佐剂的组成包括:液体石蜡、羊毛脂、卡介苗。
弗氏完全佐剂是用矿物油(石腊油)、乳化剂(如羊毛脂)和灭活的结核杆菌制成的油色冰型乳化剂。
在实验免疫学中,可用本品促进弱抗原物质抗体的生成。在药理学中,可用它制造动物关节炎模型。
该佐剂是由美籍匈牙利细菌学家JulesThomasFreund(1891—1960)发明的,故以其名子命名。因该佐剂中含分枝杆菌,故又称为分枝杆菌佐剂。不含分枝杆菌者为弗氏不完全佐剂。
动物免疫实验中完全佐剂和不完全佐剂的作用差别.
弗氏不完全佐剂
产品简介:弗氏完全佐剂是一种油包水的乳浊液,含结核分枝杆菌的细胞壁成分.佐剂活性来自于油滴中免疫原的持续释放,并刺激局部免疫反应.弗氏完全佐剂用于初次免疫刺激.为了减少副作用,不含结核分枝杆菌成分的弗氏不完全佐剂用于加强免疫.
弗氏完全佐剂
产品简介:弗氏完全佐剂是一种油包水的乳浊液,能够非常有效的诱导产生高滴度的抗体.弗氏完全佐剂含结核分枝杆菌的细胞壁成分,可以加强对抗原的抗体反应.佐剂活性来自于油滴中免疫原的持续释放,并刺激局部免疫反应.
变态反应 实验 为什么用弗氏完全佐剂
佐剂是非特异性免疫增强剂,当与抗原一起或预先注入机体时,可增强机体对抗原的免疫应答或改变免疫应答类型。
佐剂有很多种;例如氢氧化铝佐剂、短小棒状杆菌、脂多糖、细胞因子、明矾等。弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂是目前动物试验中最常用佐剂。
由于佐剂能增强抗原表面面积,并能延长抗原在体内保留时间,使抗原与淋巴系统细胞有充分接触时间,所以它有多种作用:
(1)把无抗原性的物质转变为有效的抗原;
(2)增强循环抗体的水平或产生更有效的保护性免疫;
(3)改变所产生的循环抗体的类型;
(4)增强细胞介导的超敏反应的能力;
(5)产生实验性自身免疫或其他类型的变态性疾病;
(6)保护抗原(特别是DNA,RNA)不受体内酶的分解。
免疫佐剂的常用佐剂
佐剂主要可分为两种:一种本身具有免疫原性,如百日咳杆菌、抗酸杆菌(结核分枝杆菌)以及革兰阴性杆菌等;另一种本身无免疫原性,如氢氧化铝、磷酸钙、矿物油乳剂、表面活性剂等。目前应用最多的是弗氏佐剂(Freund adjuvant)。 弗氏佐剂是目前动物实验中最常用的佐剂,分为不完全弗氏佐剂和完全弗氏佐剂。不完全弗氏佐剂是液体石蜡与羊毛脂混合而成,组分比为1~5:1,可根据需要而定,通常为2:1。不完全佐剂中加卡介苗(最终浓度为2~20mg/ml)或死的结核分枝杆菌,即为完全弗氏佐剂(FCA)。 一般首次注射时用1/2体积FCA加上1/2体积的抗原进行乳化,第二次或第三次注射时用不完全佐剂或不用佐剂。如不加佐剂,则抗原量增大10-20倍。
配制方法:按比例将羊毛脂与石蜡油置容器内,用超声波使之混匀,高压灭菌,置4℃下保存备用。
在免疫动物前,先将弗氏佐剂与抗原按一定比例混合,佐剂和抗原体积比一般为1:1,制备成 油包水乳状液。因为含SDS很易促使其乳化成油包水抗原乳化复合物,注射入动物体内时一定要保持乳化状态。抗原用量视抗原分子量不同及免疫原性及免疫动物不同而有一定差异,无统一标准和固定模式。一般是每兔(约2kg重)或每羊(约20kg重)第1次注射抗原1mg,以后逐次增加抗原量,最多每次不超过3mg。佐剂与抗原乳化可按如下方法进行:
(1) 研磨法:先将佐剂加热并取适量放入无菌的玻璃研钵内,待冷却后再缓缓滴入等体积的抗原溶液,边滴边按同一方向研磨,滴加抗原的速度要慢。待抗原全部加入后,继续研磨一段时间,使之成为乳白色粘稠的油包水乳剂。本法适于制备大量的佐剂抗原,缺点是研钵壁上粘附大量乳剂,抗原损失较大。
2) 注射器混合法:将等量的弗氏佐剂和抗原溶液分别吸入两个注射器内,两注射器之间以一细胶管相连,注意排净空气,然后交替推动针管,直至形成粘稠的乳剂为止。本法优点是容易做到无菌操作,抗原损失少,适用于制备少量的抗原乳剂。但同时难以乳化完全,个别抗原,用塑料注射器根本推不动,而用玻璃注射器又有渗漏。制备好的乳化剂经鉴定才能适用。鉴定方法是将乳化剂滴入冷水中,若保持完整不分散,成滴状浮于水面,即乳化完全,为合格的油包水剂。
(3) 超声:实验室条件好点的,比如说有超声破碎仪的,一定要控制超声频率和时间,超声容易激发一些自由基,对抗原有未知损害。乳化方法要根据抗原和需要而定。 脂质体包封抗原后,可使抗原延缓释放,并且脂质体颗粒有刺激机体免疫反应的作用。因此,用脂质体包封的抗原免疫动物可提高免疫效果。
弗氏完全佐剂的配方是什么,卡介苗的最低浓度时多少?
制备IgG-弗氏完全佐剂
(1)配制佐剂:称取羊脂10g,取石腊油40ml(一般为1∶4,夏天可减少石腊油比例)置高压灭菌器灭菌后用无菌研钵研磨均匀,置4℃冰箱过夜,次日仍均匀粘稠无分层,即成为福氏不完全佐剂。将其放入无菌研钵、按一个方向边研磨边加入卡介苗(以10ml不完全佐剂计,应加卡介苗30~100mg),磨毕置4℃冰箱过夜,如不分层即可使用,此为弗氏完全佐剂(现有市购商品)。